Tumor Cell Derived Lnc-FSD2-31:1 Contributes to Cancer-Associated Fibroblasts Activation in Pancreatic Ductal Adenocarcinoma Progression through Extracellular Vesicles Cargo MiR-4736 《RESEARCH ARTICLE》(IF=17.521)

胰腺导管腺癌（PDAC）死亡率高，总生存率短。

癌症相关成纤维细胞（CAFs）在PDAC中作为癌细胞的避难所。

CAFs与癌细胞之间的细胞内通信机制有待探索。

长链非编码RNA（lncRNAs）参与调节PDAC的肿瘤发生和肿瘤进展；然而，在肿瘤微环境中，特定的lncRNA及其作用机制尚未明确。

本研究旨在鉴定PDAC中参与癌细胞和CAFs之间细胞相互作用的新型 lncRNA。

为此，研究团队筛选了长期和短期生存的PDAC患者之间差异表达的lncRNA。

Lnc-FSD2-31：1在长期生存患者中显著增加。

这项研究随后发现，肿瘤来源的lnc-FSD2-31：1通过细胞外囊泡（EVs）运输的miR-4736抑制CAFs的激活。

在机制上，EVs衍生的miR-4736抑制自噬，并通过靶向ATG7促进CAFs的激活。

此外，在基因工程KPC（LSL-KrasG12D/+、LSL-Trp53R172H/+和Pdx-1-Cre）的小鼠PDAC模型中，阻断miR-4736可抑制肿瘤生长。

本研究表明，瘤内lnc-FSD2-31：1调节CAFs的自噬，从而通过EVs衍生的miR-4736激活它们。

靶向miR-4736可能是PDAC潜在的生物标志物和治疗靶点。

用转录组测序技术研究长期（>5年）和短期生存（<6个月）PDAC患者之间差异表达的lncRNAs，共鉴定出489个lncRNAs，研究团队发现一种与长期生存相关的lncRNA，名为lnc-FSD2-31：1，在肿瘤进展中尤为突出。

RNA荧光原位杂交（FISH）结果表明，lnc-FSD2-31：1定位于肿瘤细胞的细胞核和细胞质中；数据分析及体外实验发现肿瘤来源的Lnc-FSD2-31：1通过EVs抑制CAFs的激活；为了阐明lnc-FSD2-31：1与EVs之间的关系，研究团队检测了lnc-FSD2-31：1在EVs中的表达，发现这些结构中没有lnc-FSD2-31：1。

这一结果表明，癌细胞来源的EVs对CAFs的激活并不是通过lnc-FSD2-31：1的内吞作用来介导的。

前期的研究证实自噬与PDAC进展密切相关。

发现关键自噬基因ATG7的mRNA是最显著差异表达的。

研究团队假设lnc-FSD2-31：1可能通过ATG7调控CAFs中的自噬。

采用RNA免疫沉淀（RIP）试验和双荧光素酶报告试验，以确定miR-4736是否通过靶向ATG7激活CAFs。

数据显示，miR-4736和ATG7在抗 AGO2微球中明显富集，miR-4736抑制了自噬并激活了CAFs；研究团队引入溶酶体酸化和与自噬体融合抑制剂巴弗洛霉素A1来阻断LC-3溶酶体降解，并研究miR-4736-ATG7轴调控中是否存在自噬体积累。

结果表明miR-4736直接靶向ATG7，抑制CAFs中自噬小体的形成并激活纤维化。

为了探究lncFSD2-31：1对肿瘤生长的影响，在肿瘤细胞中，高水平的lnc-FSD2-31：1可以抑制肿瘤生长，而在CAFs中抑制ATG7可以挽救这些作用；转基因小鼠模型实验发现miR-4736抗他戈米尔通过激活自噬和失活CAFs来抑制肿瘤进展。

此外，研究团队从21例健康供体和15例PDAC患者的血浆中分离出EVs，PDAC患者的血浆EVs-miR-4736水平明显高于健康供体，这表明miR-4736可能是一种潜在的治疗药物和PDAC的预测目标。

总之，研究团队发现肿瘤来源的lnc-FSD2-31：1通过EVs衍生的miR- 4736调控CAFs的自噬和纤维化。

MiR-4736可能为PDAC诊断和治疗的潜在靶点。

作者使用伯信生物明星产品RIP试剂盒进行了上述分子互作调控机制的研究。

原文链接：https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/advs.202203324