CRISPR/Cas9
发布时间 :2017-04-21
基因敲除;基因突变;基因敲入;基因敲低;基因过表达。

 crRNA(CRISPR-derived RNA)通过碱基配对与 tracrRNA(trans-activating RNA)结合形成 tracrRNA/crRNA 复合物,此复合物引导核酸酶 Cas9 蛋白在与crRNA 配对的序列靶位点剪切双链DNA。而通过人工设计这两种 RNA,可以改造形成具有引导作用的sgRNA(singleguide RNA),足以引导 Cas9 对 DNA 的定点切割。

作为一种 RNA 导向的 dsDNA 结合蛋白,Cas9 效应物核酸酶是已知的第一个统一因子(unifying factor),能够共定位 RNA、DNA和蛋白,从而拥有巨大的改造潜力。将蛋白与无核酸酶的 Cas9(Cas9 nuclease-null)融合,并表达适当的 sgRNA,可靶定任何 dsDNA序列,而 sgRNA 的末端可连接到目标DNA,不影响 Cas9 的结合。因此,Cas9 能在任何 dsDNA 序列处带来任何融合蛋白及 RNA,这为生物体的研究和改造带来巨大潜力。

 

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① 检测报告(实验仪器、试剂、方法、结果、结论);

② 测序结果:测序彩色波形图、测序方向图、序列碱基图。

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