酵母双杂交技术
发布时间 :2016-07-08
蛋白质两两之间相互作用;蛋白质与cDNA文库互作蛋白筛选

 酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system的建立基于对真核生物调控转录起始过程的认识。酵母转录因子GAL4含两个结构域:DNA结合功能域和转录激活结构域,前者可识别DNA上的特异序列,并使转录激活结构域定位于所调节基因的上游,后者同转录复合体的其他成分作用,启动相应基因的转录。

 将编码DNA结合功能域的基因与已知诱饵蛋白质基因构建在同一个表达载体上,将编码DNA转录激活域的基因和与已知捕获蛋白质基因构建在同一个表达载体上,同时将上述两种载体转化改造后的酵母。当两种载体所表达的融合蛋白质能够相互作用时,功能重建的反式作用因子能够激活酵母基因组中的报告基因,从而通过功能互补和显色反应确定蛋白质间的互作关系。

 

客户提供

① 目标蛋白质名称、物种信息、基因 ID(验证性);

② 诱饵蛋白质名称、物种信息、基因 ID、组织或细胞(探究性);


伯信提供

① 实验报告(实验仪器、试剂、方法、结果、结论)

② 文库(探究性)。

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