ChIP 方法是通过物理或化学方法交联细胞,选择与转录因子特异性结合的抗体,目标转录因子与抗体发生免疫沉淀,作用于启动子区域的转录因子就会被ProteinA/G 拉下,最后用染色体片段做高通量测序,从而确定该转录因子与基因组的结合区域。 本试剂盒采用微球菌核酸酶(Micrococcal nuclease, MNase)进行染色质的片段化。微球菌核酸酶来源于金黄色葡萄球菌,是一种非特异性的单链或双链 DNA 及 RNA 核酸内切酶,特别是只酶解核小体连接区的 DNA,而核小体上的 DNA 被组蛋白保护而不被降解,因此被应用于染色质片段化。比超声法更精准、更均一,片段化条件更易优化,而且处理条件温和,对 DNA 与蛋白结合的损伤更小,蛋白不易发生变性,后续免疫沉淀的效果更好、实验重复性更佳。
实验原理:
在活细胞状态下使细胞内的蛋白质和DNA交联,并用微球菌核酸酶以及超声波将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段。选择与目的蛋白特异性结合的抗体免疫沉淀DNA-蛋白质复合体,从而特异性地富集与目的蛋白结合的染色体片段。
产品优势:
1. 高效及特异的富集效率;阳性和阴性对照的富集比率>120。
2. 对下游分析方法的兼容性强,可兼容RT-qPCR、基因芯片和高通量测序等。
3. 优秀的技术服务团队,技术服务高效、全面、迅速,能及时帮助客户尽快解决实验中遇到的问题。
技术流程:
实例:

详见产品说明书:Bes5008:https://v2.fangcloud.com/share/c42d71fc2b5612cab8aa7c69a5




