Ca2+作为细胞内的第二信使，调控着许多重要的生理活动。从六十年代开始，一些研究小组就已经开始合成各种荧光剂进行定量检测Ca2+浓度，目前常用的荧光剂有第二代的fura-2, indo-1, rhod-2以及第三代的Fluo-3, Fluo-4, Fluo-5系列、Calcium Green等。

       荧光探针法：Fluo-3 AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料，是广泛用于长波长的荧光钙指示剂。Fluo-3 AM的荧光非常弱，其荧光不会随钙离子浓度升高而增强。Fluo-3 AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3，从而被滞留在细胞内。Fluo-3可以和钙离子结合，结合钙离子后可以产生较强的荧光，最大激发波长为506nm，最大发射波长为526nm。通过产生的荧光反映细胞内的钙离子浓度。

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