分子探针与表观遗传学研究好文分享:短反向重复序列诱导的circEXOC6B通过增强RBMS1和HuR的结合来抑制前列腺癌的转移
发布时间 :2022-08-23| BY :伯信官网
分子探针与表观遗传学研究好文分享: The short inverted repeats-induced circEXOC6B inhibits prostate cancer metastasis by enhancing the binding of RBMS1 and HuR《Molecular Therapy》(IF=12.91)




文章摘要:


环状rna(circRNAs)是一类新型的内源性rna,具有共价式的闭环结构。


许多环状rna已经被发现参与了癌症的进展。


然而,前列腺癌(PCa)中环状rna的详细生成过程、功能和相关机制仍在很大程度上是未知。


在目前的研究中,复旦大学研究团队发现了circEXOC6B,一种新的抑制前列腺癌转移的抑制因子。


在功能上,来源于外囊复合物成分6B (EXOC6B)基因的circEXOC6B在体内外都抑制了PCa的迁移和侵袭。


在机制上,circEXOC6B作为蛋白支架,增强了RNA结合基序单链相互作用蛋白1(RBMS1)和抗原R(HuR)的结合,并进一步增加了a-激酶锚定蛋白12(AKAP12)的表达,以抑制PCa转移。


另外,与之前的研究不同的是,研究团队发现两侧内含子中的一对短的反向重复序列,至少在一定程度上促进了circEXOC6B的循环化。


我们的研究揭示了一种新的机制,揭示了circEXOC6B在前列腺癌转移中的抑制作用,并为环状rna生成的分子过程提供了新的见解。





在文章中,研究发现CircEXOC6B与RBMS1和HuR结合形成三元配合物,circEXOC6B由于缺乏内部核糖体进入位点(IRES)而没有翻译潜能。






研究团队运用RNA pull-down 和LC-MS/MS进行实验分析。 


采用LC-MS/MS(up)和蛋白印迹法检测RNA pull-down 沉淀物中的RBMS1和HuR蛋白。 


用RIP检测证实了circEXOC6B与RBMS1和HuR的结合。


同时 Co-IP检测显示RBMS1和HuR可以相互结合。






由circEXOC6B、RBMS1和HuR形成的三元配合物的模拟图,显示了circEXOC6B中RBMS1和HuR潜在的结合区域,RNA pull-down 和RIP检测证实了circEXOC6B中RBMS1和HuR的结合区域。







Co-IP显示从circEXOC6B中删除两个蛋白的结合区域时,RBMS1和HuR之间的相互作用不会增强。



作者使用伯信生物明星产品RNA pull-down Kit 、RIP Kit以及Co-IP Kit三款试剂盒进行了上述分子互作调控机制的研究。


原文链接:https://www.cell.com/molecular-therapy-family/molecular-therapy/pdf/S1525-0016(22)00494-4.pdf?_returnURL=https%3A%2F%2Flinkinghub.elsevier.com%2Fretrieve%2Fpii%2FS1525001622004944%3Fshowall%3Dtrue